作者：顧佳琴

《中華人民共和國藥典》2020年版四部中規(guī)則：常用的滅菌方法有干冷滅菌法、干熱滅菌法、輻射滅菌法、氣體滅菌法、過濾除菌法、汽相滅菌法、液相滅菌法。可依據(jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。嚴(yán)厲的滅菌操作十分重要，會影響整個實驗?zāi)芊耥樌恼归_，筆者依據(jù)日常實踐操作狀況選擇了相順應(yīng)的滅菌方法停止操作，并對其方法停止了匯總?cè)缦拢?/p>

一、干冷滅菌

經(jīng)過熱蒸汽或沸水使細(xì)菌蛋白質(zhì)、核酸變性而殺滅微生物的方法。

分為三種：

1、煮沸滅菌：加熱使水至沸而殺滅細(xì)菌的方法。凡不適于高壓蒸汽滅菌的物品可常壓下在水中煮沸一段時間到達(dá)滅菌目的。

2、流通蒸汽滅菌：常壓下，用蒸籠、蒸鍋等在100℃滅菌。僅可殺死細(xì)菌繁衍體，不能完全殺滅芽孢。

3、高壓蒸汽滅菌：經(jīng)過加壓提高蒸汽溫度，穿透力強(qiáng)、溫度高、滅菌效果*好。是*牢靠*適用*普遍的滅菌方法，普通采用121℃高壓滅菌15～20min或許116℃高壓滅菌30min。培育基、膠塞、玻璃器材等凡耐高平和濕潤的物品可運用本法滅菌。滅菌時，容器不可密封，需與滅菌鍋內(nèi)空氣流通。完全排出高壓滅菌器內(nèi)的冷空氣。（冷空氣存在時，同一表壓下所到達(dá)的溫度值偏低，不契合規(guī)則的要求，滅菌就不徹底）。

二、干熱滅菌

應(yīng)用熱空氣傳遞或高溫灼燒停止的滅菌，殺死微生物和芽孢。

分為二種：

1、灼燒主要用于接種工具滅菌，如接種針、接種環(huán)、刀、剪、等在火焰上炙烤即可到達(dá)徹底滅菌。將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等在火焰旁停止無菌操作，應(yīng)用火焰對管口等停止滅菌，防止管口污染，作為無菌操作進(jìn)程中的輔佐滅菌手腕。

2、干熱空氣滅菌是應(yīng)用熱輻射及干熱空氣停止滅菌，普通運用于金屬物品、玻璃器材等不能與蒸汽接觸的物品滅菌，須在160℃～170℃左右堅持恒溫2～3小時。

三、紫外線滅菌

應(yīng)用紫外燈停止輻射滅菌。可以對微生物蛋白質(zhì)的破壞使其滅活。

1、在實踐操作中，無菌室內(nèi)的污染任務(wù)臺、生物平安柜、傳遞窗等裝置紫外燈。普通僅起殺死空氣中、物體外表、空中等局部微生物的作用，紫外線輻射的穿透力很弱，而不能起到完全滅菌的作用。

2、紫外線消毒方法驗證中紫外燈需確認(rèn)的參數(shù)主要有紫外線的波長、紫外線強(qiáng)度、燈管的壽命。

3、紫外燈消毒的效果與紫外線強(qiáng)度、照射時間、溫度與濕度等要素有關(guān)，還需經(jīng)過驗證來確定。

4、紫外線直射對眼、皮膚有損害。紫外線照射進(jìn)程中發(fā)生臭氧，臭氧過多對眼及鼻腔有撫慰，發(fā)生頭暈、胸悶、血壓降低，所以無菌室及污染任務(wù)臺紫外線照射中止后，請稍等片刻，讓臭氧流失，方可停止實驗操作。

四、除菌過濾

以物理的方法除去介質(zhì)中的微生物。常將空氣或液體中的微生物及雜質(zhì)用不同資料制成的薄膜濾器過濾失掉無菌、無雜質(zhì)的空氣或液體。

濾過細(xì)菌的濾膜孔徑為0.22μm（或更小孔徑或相反過濾效能）。

總結(jié)：在檢驗進(jìn)程中，無論采用什么方法，都應(yīng)思索到原有成分的動搖性和平安性，對滅菌條件除了要求經(jīng)濟(jì)性、環(huán)保性和滅菌徹底外，還要必需保證被滅菌物質(zhì)成分不被破壞。不影響物品的質(zhì)量。

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