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Traj18基因敲除免疫缺陷小鼠模型

健明迪檢測提供的Traj18基因敲除免疫缺陷小鼠模型,討論與結(jié)論 該品系可用于NKT細胞相關(guān)的多種疾病及發(fā)育相關(guān)研究。 生物安全性 動物模型的制備和應(yīng)用實驗必須在具備相應(yīng)資質(zhì)的實驗室開展,具有CMA,CNAS認證資質(zhì)。
Traj18基因敲除免疫缺陷小鼠模型
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討論與結(jié)論

該品系可用于NKT細胞相關(guān)的多種疾病及發(fā)育相關(guān)研究。

生物安全性

動物模型的制備和應(yīng)用實驗必須在具備相應(yīng)資質(zhì)的實驗室開展。動物模型的制備、應(yīng)用過程中的監(jiān)督管理、處置措施、對環(huán)境和生態(tài)影響等應(yīng)符合國家相關(guān)法律規(guī)定。

評價驗證

通過流式細胞儀對敲除小鼠的胸腺、脾臟和肝臟的NKT細胞進行了分析,包括B220、CD3ξ,CD4,CD8α,TCRβ,相關(guān)的標(biāo)記購買自BD公司。為驗證該基因?qū)δ[瘤的抵抗作用,選取肝臟轉(zhuǎn)移的B16黑色素瘤,對小鼠進行靜脈注射,同時選擇αGalCer-DC細胞注射作為另一實驗組。

流式細胞儀分析,Traj18基因敲除小鼠的NKT細胞在胸腺、脾臟和肝臟都沒有表達:

接種腫瘤實驗表明,該敲除小鼠對腫瘤的耐受能力下降:

制備方法

背景小鼠:C57BL/6J

構(gòu)建信息:應(yīng)用CRISPR/Cas介導(dǎo)的基因組工程技術(shù)建立 Traj18基因敲除小鼠模型;小鼠Traj18基因(Gene ID: 100124371)位于小鼠14號染色體上,小鼠的Traj18基因為目的位點:

將構(gòu)建兩對gRNA靶向載體,并經(jīng)測序證實。體外轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的Cas9mRNA和gRNA將被共同注射到受精卵中,以促進KO小鼠的產(chǎn)生。用PCR進行仔鼠基因分型,然后進行序列分析;將Traj18基因的gRNA和Cas9mRNA共注射到受精卵中,以產(chǎn)生有針對性的敲除后代。通過PCR鑒定F0代首建鼠,隨后進行序列分析,然后與野生型小鼠繁殖獲得F1代,再進行鑒定,F(xiàn)1代再進行繁殖,最終獲得純合子小鼠。PCR反應(yīng)體系及條件為

研究背景

天然殺傷T細胞(NKT)是T淋巴細胞的一個獨特的子集,它通過細胞因子的快速釋放和與免疫系統(tǒng)其它細胞直接作用來調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)。因此NKT細胞作為先天和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)之間的重要聯(lián)系,是免疫療法的有前景的靶點。I型NKT細胞,也稱iNKT細胞,是小鼠中最常見的NKT細胞,在人類中具有相似的特性。

TRAJ18基因與TRAv11基因結(jié)合,形成具有適當(dāng)抗原特異性的iNKT細胞受體(Tcr)。有報道指出敲除TRAJ18基因的小鼠,約60%的TCRα多樣性缺乏。

參考文獻:

1. Lower TCR repertoire diversityin Traj18-deficient mice.

2. Generation of NovelTraj18-Deficient Mice Lacking Vα14 Natural Killer T Cells with an Undisturbed TCell Receptor α-Chain Repertoire.

3. Mutation of the Traj18 genesegment using TALENs to generate Natural Killer T cell deficient mice.

模型信息

中文名稱:Traj18基因敲除免疫缺陷小鼠模型

英文名稱:traj18 knock out, immune deficiency mice model

< b=""> 類型:免疫性疾病動物模型 <>

分級:NA

用途:用于自然殺傷T細胞相關(guān)疾病研究、發(fā)育研究等。

研制單位:北京華阜康生物科技股份有限公司

保存單位:北京華阜康生物科技股份有限公司

哪里可以做Traj18基因敲除免疫缺陷小鼠模型服務(wù)?研究用途:用于自然殺傷T細胞相關(guān)疾病研究、發(fā)育研究等。
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